Раздел 6.1 Дифференциальная активность генов, выбор
адекватных биологических моделей.
Раздел 6.2 Анализ регуляторных элементов гена, изоляция
и исследование мРНК, искусственные
транскрипционные системы.
Раздел 6.3 Анализ трансляции, ДНК-экспрессионные систе-
мы.
ГЛАВА VII. МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПРЕНАТАЛЬНОЙ
ДИАГНОСТИКИ НАСЛЕДСТВЕННЫХ БОЛЕЗНЕЙ.
Раздел 7.1 Прямые и косвенные методы молекулярной диаг-
ностики.
Раздел 7.2 ДНК-диагностика при различных типах наследо-
вания.
Раздел 7.3 Группы риска, поиск гетерозиготных носите-
лей мутаций.
Раздел 7.4 Особенности применения молекулярных методов
в пренатальной диагностике моногенных болез-
ней.
Раздел 7.5 Доимплантационная диагностика, общая схема
пренатальной диагностики, точность прогнози-
рования.
ГЛАВА YIII. БИОЛОГИЧЕСКИЕ МОДЕЛИ НАСЛЕДСТВЕННЫХ БОЛЕЗНЕЙ
ЧЕЛОВЕКА.
Раздел 8.1 Генетические линии животных.
Раздел 8.2 Трансгенные животные.
Раздел 8.3 Экспериментальное моделирование.
Раздел 8.4 Конструирование модельных генетических ли-
ний животных.
Раздел 8.5 Методы направленного переноса генов.
ГЛАВА IX. ГЕННАЯ ТЕРАПИЯ.
Раздел 9.1 Определение, историческая справка, программы
генной терапии.
Раздел 9.2 Типы генотерапевтических вмешательств, выбор
клеток-мишеней.
Раздел 9.3 Методы генетической трансфекции в генной те-
рапии.
Раздел 9.4 Конструирование векторных систем и совер-
шенствование методов трансформации клеток че-
ловека.
9.4.1 Основные векторные системы.
9.4.2 Методы физического переноса чужеродной ДНК в
клетки эукариот.
9.4.3 Липосомный метод трансфекции.
9.4.4 Рекомбинантные вирусы.
9.4.5 Перспективы создания "идеальных" векторных
систем.
Раздел 9.5 Генотерапия моногенных наследственных заболе-
ваний.
Раздел 9.6 Генотерапия ненаследственных заболеваний:
опухоли, инфекции.
Раздел 9.7 Некоторые этические и социальные проблемы ген-
ной терапии.
ГЛАВА X. МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА НЕКОТОРЫХ
МОНОГЕННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ.
Раздел 10.1 Хромосомная локализация и принципы класси-
фикации генов наследственных болезней.
Раздел 10.2 Метаболические дефекты лизосомных фермен-
тов. Болезни накопления.
Раздел 10.3 Болезни экспансии, вызванные "динамически-
ми" мутациями.
Раздел 10.4 Моногенные наследственные болезни, диаг-
ностируемые молекулярными методами в России.
10.4.1 Муковисцидоз.
10.4.2 Миодистрофия Дюшенна.
10.4.3 Гемофилия А.
10.4.4 Гемофилия B.
10.4.5 Болезнь Виллебранда.
10.4.6 Фенилкетонурия.
10.4.7 Синдром Леш-Нихана.
10.4.8 Болезнь Вильсона-Коновалова.
10.4.9 Адрено-генитальный синдром.
10.4.10 Спинальная мышечная атрофия.
10.4.11 Атаксия Фридрейха.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ГЛАВА Y.
ПОПУЛЯЦИОННЫЙ АНАЛИЗ МУТАЦИЙ. МЕХАНИЗМЫ СПОНТАННОГО
МУТАГЕНЕЗА.
Раздел 5.1 Полиморфизм, неравновесность по сцеплению.
Молекулярная идентификация мутантных аллелей и разра-
ботка эффективных методов их диагностики у больных и у гете-
розиготных носителей являются той экспериментальной базой,
которая позволяет исследовать распространенность мутаций в
различных этнических группах и популяциях. Одновременно воз-
можен анализ сцепления мутантных аллелей с другими генети-
ческими маркерами и оценка на этой основе предполагаемых ме-
ханизмов возникновения и поддержания в популяциях наблюдае-
мого уровня изменчивости. Но прежде чем перейти к описанию
основных целей и методов популяционного анализа мутаций оп-
ределим более точно два основных понятия, часто используемых
при проведении подобных исследованиях - это понятия полимор-
физма и неравновесности по сцеплению.
Генетическая изменчивость локуса в определенной попу-
ляции измеряется уровнем полиморфизма, и количественным вы-
ражением этой меры служат частоты аллелей. В однолокусной
двухаллельной системе частоты двух вариантов аллелей - А1 и
А2, обозначаются буквами p и q, соответвственно, и (p+q=1).
Когда мы говорим, что в популяции существует полиморфизм по
мутации, это значит, что ее частота выше определенного выб-
ранного в соответствии с какими-то причинами условного уров-
ня, чаще всего выше 5%. Высокополиморфными считаются локусы
с близкими значениями частот аллелей. В больших популяциях
со случайным характером скрещивания, то есть в панмикти-
ческих популяциях, действует закон Харди-Вайнберга, согласно
которому частоты гомозиготных особей в популяции равны p!2 и
q!2, соответстенно, а доля гетерозигот равна 2pq. Таким об-
разом, в двухаллельной модели частота гетерозигот в популя-
ции по полиморфным локусам составляет от 10% и более, а по
высокополиморфным локусам может достигать 50%. Если число
аллелей в локусе больше двух, общая частота гетерозигот в
популяции равна 1 - (p1!2 + p2!2 + ... + pn!2), где pk -
частота аллеля Ak, k = 1, 2, ... n и p1 + p2 +... + pn = 1.
При этом доля гетерозигот в популяции возрастает с увеличе-
нием числа аллелей и достигает максимального предела в каж-
дой группе из n аллелей при равенстве их частот. Таким обра-
зом, при увеличении числа аллелей, встречающихся с равными
вероятностями, частота гетерозигот в популяции будет стре-
миться к единице, то есть подовляющее число особей в популя-
ции будут гетерозиготными по данному локусу. Такая ситуация
характерна для высокополиморфных микросателитных повторов, в
частности STR, что и делает их наряду с другими преимущест-
вами наиболее удобными генетическими маркерами.
Как мы уже упоминали, частыми моногенными наследствен-
ными заболеваниями считаются такие, при которых один больной
ребенок встречается среди 2000 - 10000 новорожденных, то
есть q!2 колеблется в пределах 1 /2000 - 1/10000. Соот-
ветственно, частота мутаций - q, в этих генах составляет от
0.5% до 2.5% и доля гетерозиготных носителей - 2pq, достига-
ет 1% - 5%. Для более редких заболеваний частоты гетерозигот
не превышают десятых долей процента. Тем ни менее, если
учесть, что общее количество различных моногенных заболева-
ний составляет около 5000 нозологий, оказывается, что, в
среднем, каждый человек является носителем мутантных аллелей
около десяти генов. В общем случае, набор этих генов разли-
чен у разных людей, и только в тех семьях, где оба родителя
являются носителями мутаций одного и того же гена появляется
25%-ый риск рождения больного ребенка.
До сих пор мы рассматривали изменчивость в одном локусе
- A. Понятие неравновесности по сцеплению определяет отноше-
ния между изменчивостью в двух локусах - A и B. Ситуация
здесь может быть двоякой. Если изменчивость в этих локусах
независима, то аллели двух локусов встречаются в популяции в
случайных комбинациях. Однако, если аллели различных локусов
в одних комбинациях встречаются чаще, чем в других, то гово-
рят, что существует неравновесность по сцеплению. Количест-
венно эта связь оценивается с помощью детерминанта неравно-
весности по сцеплению - d. Рассмотрим, чему равен детерми-
нант неравновесности по сцеплению в двухлокусной двухаллель-
ной системе. Пусть Pnm, где n=1,2 и m=1,2, частоты четырех
возможных в этом случае типов гамет - A1B1, A2B2, A1B2,
A2B1, а Pn и Rm - частоты аллелей локусов A и B, соот-
ветственно. Если сочетания аллелей в гаметах случайны, то
теоретически ожидаемые частоты гамет четырех типов равны
произведению частот входящих в эти гаметы аллелей, то есть
Pnm=Pn*Rm. В этом случае произведение частот двух типов га-
мет (A1B1 и A2B2), находящихся в состоянии "притяжения",
равно произведению частот гамет в состоянии "отталкивания"
Страницы: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73
