физиологической роли Са2+ представлены в работах Рингера и Бакстона. Авторы
обнаружили, что изолированное сердце лягушки прекращает сокращения при
отсутствии кальция в омывающем растворе. Так появились раствор Рингера и
другие физиологические солевые растворы.
Камада и Киносита, а затем Хейлбрун и Вертинский проверяли участие Са2+
в регуляции мышечного сокращения путем введения разных катионов внутрь
мышечных волокон. Из всех изученных ионов только кальций вызывал сокращение
при концентрациях, соизмеримых с концентрациями Са2+ обычно наблюдаемыми в
живой ткани. Впоследствии было обнаружено, что скелетная мышца не
сокращается в ответ на деполяризацию мембраны, если исчерпаны запасы
кальция во внутренних депо, а подвергнутые предварительной экстракции
препараты волокон скелетной мышцы не сокращаются при добавлении АТФ, если
отсутствует Са2+.
Количественная зависимость между концентрацией свободного Са2+ в
саркоплазме и силой мышечного сокращения была установлена сравнительно
недавно. Для проведения анализа удаляли поверхностную мембрану и оголенные
миофибриллы обрабатывали растворами кальция различной концентрации. Сила
возрастает от нуля при концентрации кальция около 10-8 М до максимального
значения при концентрации кальция около 5х10-6 М. Данная зависимость между
силой и концентрацией Са2+ аналогична зависимости между АТФазной
активностью (скоростью гидролиза АТФ) гомогенизированных миофибрилл и
концентрацией Са2+. Такое совпадение характеристик наводило на мысль, что
Са2+ служит кофактором АТФазной активности миозина. Но оказалось, что это
не так.
АТФазная активность чистого раствора миозина довольно низкая, но сильно
возрастает при добавлении очищенного актина. Это указывает на то, что
АТФазный центр миозина активируется при связывании миозина с актином. В
интактной мышце активация АТФазного центра миозина осуществляется при
присоединении поперечного мостика к активному филаменту. Эксперименты,
проведенные в лаборатории Эбаши, показали, что тропонин и тропомиозин,
лежащие вдоль актиновой спирали, препятствуют присоединению миозиновых
поперечных мостиков к актину. Тропонин – единственный белок в актиновых и
миозиновых филаментах поперечнополосатых мышц позвоночных животных, имеющий
высокое химическое сродство к Са2+. Каждый тропониновый комплекс связывает
четыре иона кальция. Тропониновые комплексы расположены вдоль актинового
филамента через каждые 40 нм, прикрепляясь одновременно к актиновому
филаменту и молекуле тропомиозина. В состоянии покоя положение тропомиозина
конформационно препятствует соединению головок миозина с актиновым
филаментом. Связывая Са2+, тропонин претерпевает конформационные изменения,
в результате чего молекула тропомиозина смещается и освобождает дорогу
миозиновым поперечным мостикам для прикрепления к актиновым центрам.
Следовательно, присоединение Са2+ к тропонину устраняет постоянно
существующее препятствие для взаимодействия поперечных мостиков с актином.
Из результатов экспериментов, сделан вывод, что ингибирование присоединения
мостиков снимается при концентрации свободного Са2+ свыше 10-7 М.
Сказанное выше объясняет роль Са2+ в регуляции актин-миозинового
взаимодействия в скелетных и сердечной мышце позвоночных животных. В
большинстве других мышц роль кальция иная. Есть еще по крайней мере два
механизма кальцийзависимой регуляции актин-миозинового взаимодействия. В
поперечнополосатых мышцах большинства беспозвоночных животных кальций
инициирует сокращение, присоединяясь к легким полипептидным цепям миозина в
головках поперечных мостиков. В гладких мышцах позвоночных животных и в
немышечном актомиозине сокращение контролируется кальцийзависимым
фосфорилированием миозиновой головки.
Инактивация поперечных мостиков и расслабление мышцы
В мышце, находящейся в состоянии покоя, внутренняя система ограниченных
мембранами компартментов, называемая саркоплазматическим ретикулумом,
активно поглощает Са2+. Благодаря этому процессу уровень свободных ионов
кальция не поднимается выше 10-7 М. При такой концентрации поперечные
мостики неактивны, потому что с тропонином связывается лишь очень небольшое
количество кальция. Таким образом, удаление Са2+ из саркоплазмы в
ретикулуме заставляет мышцу расслабляться после сокращения.
Поскольку АТФ поставляет энергию для сокращения, напрашивается вывод,
что удаление АТФ тоже вызовет расслабление мышцы. Но оказалось, что этого
не происходит.
Мышца становится напряженной и не поддается растяжению при исчерпании
всех ее запасов АТФ и фосфагенов. Это состояние известно как трупное
окоченение, и обусловлено оно тем, что поперечные мостики не могут
отделиться от актиновых филаментов. О том, что для расслабления мышцы нужен
Мg2+-АТФ, известно со времени проведения первых экспериментов с
экстрагированными глицерином препаратами мышц. В присутствии Са2+ и Мg2+-
АТФ глицеринизированная мышца сокращается, а при удалении Са2+ –
расслабляется. Расслабление, как и сокращение, происходит только в
присутствии Мg2+-АТФ. В нормальных условиях, когда мышца обеспечена АТФ,
мостики легко отделяются. Затем, если концентрация свободного
саркоплазматического Са2+ становится ниже уровня, необходимого для процесса
присоединения поперечных мостиков к актиновым филаментам, мышца
расслабляется.
Итак, расслабление мышцы зависит от наличия Мg2+-АТФ, необходимого для
разрушения актомиозинового комплекса, и от внутриклеточной концентрации
кальция, которая должна быть достаточно низкой для предотвращения нового
прикрепления мостиков к актиновым филаментам.
Саркоплазматический ретикулум
С чего начинается поступление Са2+ в СР? Если мембраны СР выделить с
помощью фракционирования, они образуют микроскопические везикулы диаметром
1 мкм. Везикулы способны поглощать кальций из окружающей среды. Если к ним
добавить щавелевую кислоту, то внутри везикул по мере увеличения в них
концентрации Са2+ будет осаждаться оксалат кальция. Это говорит об активном
транспорте кальция мембраной ретикулума. В нефракционированной мышечной
ткани осадок оксалата кальция можно обнаружить с помощью электронного
микроскопа в терминальных цистернах. Способность СР к накоплению кальция
довольно высокая, что обеспечивает поддержание концентрации свободного Са2+
в саркоплазме расслабленной мышцы ниже 10-7 М. Этот уровень Са2+ достаточен
для разрушения связи кальция с тропонином и предотвращения сокращения.
Способность СР поглощать Са2+ из миоплазмы зависит от активности молекул
кальциевого насоса. На электронных микрофотографиях, полученных методом
замораживания-скалывания, молекулы насоса плотно прижаты («плечом к плечу»)
в мембранах, формирующих продольные элементы СР. Как и в других активных
транспортных системах, в качестве источника энергии кальциевый насос СР
использует АТФ.
Высвобождение кальция саркоплазматическим ретикулумом
Как только стало известно, что в СР накапливаются ионы кальция,
исследователи начали склоняться к мысли о том, что мышечное сокращение
инициируется Са2+, высвобождаемым в саркоплазму из внутренней среды цистерн
СР.
Сокращение активируется кальцием, высвобожденным из СР, а поверхностный
электрический сигнал, т.е. ПД, поступает в глубокие области мышечного
волокна с помощью Т-трубочек. Более того, Т-трубочки образуют тесные
контакты с концевыми цистернами саркоплазматического ретикулума. Но как
электрический сигнал из Т-трубочек передается в СР, давая команду к
высвобождению Са2+ в ответ на деполяризацию Т-трубочки, долгое время
оставалось загадкой. Сейчас, кажется, на этот важный вопрос можно ответить.
Очевидно, что при деполяризации Т-трубочек сигнал доставляется к концевым
цистернам СР посредством внутриклеточных молекул-посредников. Недавние
исследования, проведенные в Калифорнийском университете, показали, что
высвобождение Са2+ из СР и последующее сокращение одиночного поперечного
волокна могут индуцироваться инозитол-1,4,5- трифосфатом (ИФ3). Это
внутриклеточная молекула-посредник, образующаяся при разложении связанного
с мембраной фосфатидилинозитола, которая, как известно, стимулирует
высвобождение Са2+ из внутриклеточных хранилищ в некоторых тканях. В
отношении мышц есть сведения, что вещества, блокирующие образование ИФ3,
нарушают сопряжение процессов сокращения волокна и деполяризации мембран.
Показано, что такими вещества мешают нормальному высвобождению Са2+ из СР в
ответ на электрическое возбуждение мышцы. И наконец, вещества, блокирующие
ферментативное разложение ИФ3, напротив, усиливают эффективность ИФ3, в
инициации сокращения мышечного волокна. Такого рода данные послужили
поводом для возникновения гипотезы, утверждающей, что деполяризация Т-
трубочек вызывает образование ИФ3, а уже затем ИФ3, действует как
внутриклеточный посредник, индуцирующий высвобождение Са2+ из СР (рис.5).
Согласно этой гипотезе, начальная стадия сопряжения процесса «возбуждение –
сокращение» сопровождается распространением возбуждения по поверхности
системы Т-трубочек и представляет собой активацию чувствительных к
электрическому напряжению ферментов, расположенных на мембране данных
трубочек рядом с концевыми цистернами СР. Эти гипотетические ферменты, по-
видимому, столь же чувствительны к изменению электрического поля мембраны,
как натриевый канал, и реагируют на это изменение конформационным сдвигом.
Вызванный деполяризацией мембраны конформационный сдвиг переводит фермент
из неактивной формы в активную. И уже этот активный фермент прямо или
косвенно определяет образование ИФ3. Затем ИФ3 диффундирует на короткое
расстояние и достигает мембраны концевой цистерны СР, где, связавшись с
рецептором, заставляет открываться кальциевые каналы. Ионы кальция,
скопившиеся в относительно высокой концентрации в просвете СР, продолжают
выходить наружу до тех пор, пока не произойдет ферментативное разрушение
ИФ3 и каналы не закроются. Потом с помощью активного транспорта
высвобожденные из СР ионы кальция возвращаются на прежнее место.
Краткое описание процессов сокращения и расслабления
Процессы, контролирующие сокращение скелетной мышцы, изображены в общем
виде на рис.6. Приведем их перечень.
1. Поверхностная мембрана мышечного волокна деполяризуется под влиянием
потенциала действия или (в некоторых мышцах) под влиянием синаптических
потенциалов.
2. Потенциал действия поступает в глубь мышечного волокна по Т-трубочкам.
3. В ответ на деполяризацию Т-трубочек сигнал, который, вероятно,
опосредуется молекулами ИФ3, распространяется от этих трубочек к концевым
цистернам саркоплазматического ретикулума.
4. Этот химический посредник вызывает открытие кальциевых каналов в СР и
высвобождение секвестированных там ионов кальция.
5. Концентрация свободного Са2+ в миоплазме возрастает от значения 10-7 М и
ниже (в покое) до приблизительно 10-6 М и более (в активном состоянии).
Кальций соединяется с тропонином, вызывая в молекуле этого белка
конформационные изменения.
6. Конформационные изменения молекулы тропомиозина устраняют
пространственное препятствие для присоединения поперечных мостиков к
актиновым филаментам.
7. Миозиновые поперечные мостики прикрепляются к актиновым филаментам и
вступают в последовательное взаимодействие с их центрами, что вызывает
вращение миозиновой головки относительно актиновых филаментов и натяжение
мостикового шарнира.
8. Натяжение мостикового шарнира приводит к активному вхождению актиновых
филаментов в А-диск. Саркомер слегка укорачивается.
9. Прежде чем произойдет следующий цикл движения миозинового поперечного
мостика, АТФ (связанная с АТФазным центром на миозиновой головке)
гидролизуется и освобожденная при этом энергия запасается в виде
конформационного изменения в молекуле миозина. Миозиновая головка отходит и
затем вновь готова присоединиться к следующему центру, расположенному по
длине актинового филамента, и повторить цикл, описанный в пп. 7 и 8. Во
время одиночного сокращения каждый поперечный мостик по мере своего
продвижения к Z-пластинке вдоль актинового филамента прикрепляется,
подтягивается и отсоединяется множество раз.
10. Наконец, в результате активной работы СР уровень Са2+ в саркоплазме
снова понижается, и тропомиозин начинает препятствовать присоединению
поперечных мостиков. Мышца остается расслабленной до тех пор, пока не
произойдет следующая деполяризации мембраны.
Между структурой саркотубулярной системы и функцией мышцы существует
интересная связь. Те мышцы, которые сокращаются и расслабляются очень
быстро, имеют высокоразвитый СР и обширную сеть Т-трубочек. А те мышцы,
сокращение и расслабление которых происходит медленно, соответственно имеют
менее развитый СР. Различные скорости сокращения и расслабления, по-
видимому, коррелируют с эффективностью СР в регуляции изменений
концентрации кальция, которые в свою очередь запускают и останавливают
сократительный механизм.
Заключение
Как уже было отмечено, мышечные ткани – это группа тканей организма
различного происхождения, объединяемых по признаку сократимости:
поперечнополосатая (скелетная и сердечная), гладкая, а также
специализированные сократимые ткани – эпителиально-мышечная и
нейроглиальная, входящая в состав радужки глаза.
Поперечнополосатая скелетная мышечная ткань возникает из миотомов,
входящих в состав элементов сегментированной мезодермы – сомитов.
Гладкая мышечная ткань человека и позвоночных животных развивается в
составе производных мезенхимы, так же как и ткани внутренней среды. Однако
для всех мышечных тканей характерно сходное обособление в составе
эмбрионального зачатка в виде клеток веретенообразной формы –
мышцеобразовательных клеток, или миобластов.
Сокращение мышечного волокна заключается в укорочении миофибрилл в
пределах каждого саркомера. Толстые (миозиновые) и тонкие (актиновые) нити,
в расслабленном состоянии связанные только концевыми отделами, в момент
сокращения осуществляют скользящие движения навстречу друг другу. Выделение
необходимой для сокращения энергии происходит в результате превращения АТФ
в АДФ под влиянием миозина. Ферментная активность миозина проявляется при
условии оптимального содержания Са2+, которые накапливаются в
саркоплазматической сети.
Список литературы
1. Гистология. Под редакцией Ю.И. Афанасьевой, Н.А. Юриной. М.:
«Медицина», 1999 г.
2. Р. Эккерт, Д. Рендел, Дж. Огастин «Физиология животных» – 1 т. М.:
«Мир», 1981 г.
3. К.П. Рябов «Гистология с основами эмбриологии» Минск: «Высшая
школа», 1990 г.
4. Гистология. Под редакцией Улумбекова, проф. Ю.А. Челышева. М.: 1998
г.
5. Гистология. Под редакцией В.Г. Елисеева. М.: «Медицина», 1983 г.
Страницы: 1, 2, 3
