исследования и характеристики фетальных Купфферовских клеток. Мы
представили здесь методы для изоляции Купфферовских клеток плода человека >
90% чистоты. Мы охарактеризовали морфологические особенности этих клеток,
окрашивая L-нафтил ацетат эстеразой и иммунофлюоресцентным окрашиванием с
мышиными моноклональными АТ, зная реакцию с человеческими макрофагами и
моноцитами. Мы не полагаем, что препараты были загрязнены периферическими
моноцитами < 0,5%, т.к. прилипшие клетки узнавались анти-Len-M1, а мышиные
моноклональные АТ характеризовались реакцией с 90% циркулирующих
человеческих моноцитов, но не с тканевыми микрофогами. Кроме того, < 1%
наших прилипших клеток были узнаваемы 3 моноклональными АТ, что
обнаруживает высокую плотность определенных человеческих Т-клеток.
На основании наших оценок ?1%-2% клеток, представленных в печени плода
человека 13-198 недель гестации, это Купфферовские клетки. Наши оценки
подтверждаются окрашиванием L-нафтил ацетат эстеразой и
иммунофлюоресцентным окрашиванием с мышиной моноклональными АТ 3С10 но
замороженных срезах и препаратах интактной печени плода. Эти оценки
соглазуются с результатами морфометрического анализа печени крыс в
электронном микроскопе, который определил, что 2,1% объема печени была
представлена Купфферовскими клетками. Кроме того, исследования
демонтрируют, что все гематопоэтические клетки могут рассматриваться в
качестве значительной пропорции от массы печени плода в течении 10-12
недель гестации; около 1-2% клеток были представлены макрофогами. При
окрашивании замороженных тканевых срезов печени плода человека 10-20 недель
гестации мышиными моноклональными АТ класса II, оценка позитивных клеток
составила 0,3% и 7,7%. Некоторые различия в оценке количества Купфферовских
клеток приписывают макрофагам в печени плода, выполняющей функцию их
созревания. Эти находки указывают на развитие процесса созревания
Купфферовских клеток в 10-20 недельный срок гестации и могут объяснить
такие наши наблюдения, что 5% прилипших клеток не могут быть распознанными
любыми моноклональными АТ против макрофагоф или моноцитов, использованных в
этом исследовании.
Далее рассмотрим основные способы лечения и профилактики образования
послеоперационных спаек у гинекологических больных.
При сравнительной оценке наиболее часто используемых адъювантов в
профилактике послеоперационных спаек [4], маточных рога 30 крыс
подвергались как разделению так и микрохирургическим анастомозам
проксимальных сегментов рогов и разделению только дистальных сегментов.
Крысы в ровной степени были разделены на 3 группы. Во 2-ой группе
исследовался дексаметазом, в 3-ей группе – ибупрофен в качестве
преоперативного и постоперативного способа профилактики спаек. Во время
операции 5 крыс каждой группы орошались физиологическим раствором и другие
5 - 32% декстраном УО (гиксон). Анастома на левом маточном роге соединен У-
О Викрилом, на правом маточном роге – У-О Дексоном. Во время повторной
лапаротомии. 2 недели спустя, нитроперитонеальные спайки были
классифицированы в соответствии с их выраженностью. Кусочки ткани были
добыты из областей анастомозов и оценивались только гистологически. Общее
количество спаек было 104 в первой группе; 53 для 2 группы (p<0.05) и 90
для 3 группы (p=0.7). Гистологическое исследование показало отсутствие
различий между тремя группами. Воспалительная реакция ткани было наименьшей
только в области разделения и наибольшей в участках анастомоза и наиболее
ярко выражено вокруг хирургических швов. Отсутствие различий в плотности
спаек или в гистологической оценке наблюдалось между левым и правым
маточными рогами. Количество спаек было значительно меньше у животных,
которым Гискон вводился нитроперитонеально (p<0,05), демонстрировала
сходные воспалительные реакции. Эти результаты подтверждают, что нет
значительных отличий между Дексоном и наложением викриловых швов, что
дексаметпзон и Гискон эффективны в профилактике послеоперационных спаек и
что воспалительная реакция тканей не изменяется данными адъювантами, но
значительно увеличивается от присутствия и количества шовного материала.
Проведены научные исследования, доказавшие способность 1%, 2% и 3%
растворов содакарбосиметилцеллюлозы (SCMC) значительно уменьшать
образование послеоперационных спаек на хирургических моделях кроликов [5]
при различных типах повреждения. Все животные, кроме 1, выжили с
отсутствием признаков инфекции или кровотечения 14 дней спустя. Одно
животное, пролеченное нитроперитонеальным введением гепаринизированного
раствора Рингера, умерло во время выздоровительного периода и было удалено
из исследования. Эффект SCMC был доза-зависимым и коэффициент корреляции
составил 0,97. Ни декстран ни гепаринизированный раствор Вингера
значительно (p?0,05) не уменьшали спайки по сравнению с «сухим» контролем.
Нитроперитонеальное введение высокомолекулярных растворов
использовалось в попытке профилактировать образование спаек после
хирургической травмы внутренних органов. Эти агенты рассматриваются в
качестве механических барьеров между серозными оболочками органов и
перитонеальной брюшиной. В реконструктивных операциях у женщин наиболее
часто использовался декстран УО или гепаринсодержащие растворы. [6]
Экспериментально доказано, что 1% раствор SCMC более эффективен, чем 32%
декстрон УО или гепаринизированный раствор Рингера в профилактике как
начала образования спаек, так и их преобразования при выскобливании слепой
кишки у крыс или после операций на маточных рогах кроликов. Объем SCMC на
килограмм веса у крыс составил от 1/3 до 1/6. В целом, механизм действия
содакарбосиметилцеллюлозы не известен, и служит в качестве барьера или
смазки, препятствуя прилипанию соседних серозных поверхностей. Elking et
al. продемонстрировали, что SCMC абсорбируется из перитонеальной полости
более медленно, что 10% декстран 40; SCMC также менее антигена, чем
декстран и меньше поддерживает рост бактерий.
В качестве препаратов, способствующих уменьшению образования
послеоперационных спаек и заживлению маточных труб, исследовались
ингибиторы простагландинового синтеза ибупрофен и флурбипрофен. [7]
Данный эксперимент проводился на Новозеландских белых кроликах, у
которых в начале лигировали маточные трубы, а затем подвергли маточные
трубы реанастамозам. В группе контроля внутривенно вводили солевой раствор,
во второй группе 75мг ибупрофена внутривенно каждые 6 часов, в третьей
группе 12,5 мг флурбипрофен внутривенно каждые 6 часов 8 доз после
операции. Как ибупрофен, так и флурбипрофен значительно уменьшили
образование послеоперационных спаек (p<0,025), но не оказали значительного
эффекта на восстановление слизистой оболочки маточных труб, на реакцию АГ-
АТ и на разрыв мышечного слоя.
Когда сравнили все исследуемые гистологические индексы, флурбипрофен
имел значительно низкий общий счет, чем в группе контроля указывая их
большую способность фкурбипрофена оказывать противоспаечный и заживляющий
эффект, чем ибупрофен. Данные препараты могут подавлять периоперативный и
постоперативный хирургически спровоцированный восполнительный ответ,
взаимосвязанный с заживлением и тем самым уменьшать образование и плотность
послеоперационных спаек.
Широкое применение в борьбе со спаечным процессом, способствующим
хронизации тазовой боли, нашли новые хирургические технологии и способы
хирургического лапароскопического лечения. [8]
30 женщин подверглись лапароскопическому лизису спаек для лечения
хронической тазовой боли и были проспективно оценены для представления
синдрома хронической боли. По окончании исследования, из них 10 были с
хроническим болевым синдромом и 4 (40%) сообщили о продолжительном
улучшении или разрешении боли при повседневных действиях и диспореунии, в
то время как у 20, у кого данный синдром отсутствовал, 15 (75%) сообщили об
улучшении (p=0,06). Прогностически не учитывалось число предыдущих
операций, количество спаек или другие физические параметры.
Лапароскопический лизис спаек – важный элемент в лечении хронической
тазовой боли, не смотря на наличие психосоциальной дооперативной оценки и
сопутствующее лечение.
Локализация спаечного процесса обуславливает и причину различных видов
бесплодия у женщин репродуктивного возраста. «Ультразвуковое спасение»:
успешная альтернативная форма восстановления ооцитов у пациентов с
периовариальными спайками. [9] Восстановление ооцитов в эксперименте
«оплодотворение/перемещение эмбриона» было проведено в 82 циклах у 73
женщин. Состояние личинков было неизвестно. Проводилась лапароскопия и
ооциты из доступных фолликулов аспирировались. Оставшиеся фолликулы были
аспирированы ультрасонографически. Число случаев восстановления доступных
фолликулов лапароскопически и ультрасонографически недоступных для
лапароскопии фолликулов было идентично. У 26 пациенток была выполнена
только лапароскопия. Один и более ооцитов были добыты у 92% пациентов. В 56
циклах, когда лапароскопия предшествовала ультразвуку, 1 и более ооцитов
были восстановлены у 95% пациентов; у 3 из этих пациенток наступила
беременность при восстановлении ооцитов только ультрасонографически после
неудачной лапароскопии. Этот метод является альтернативным лапароскопии и
подтверждает, что циклы, в течении которых происходит стимуляция овуляции
могут принести желаемый результат восстановления ооцитов у женщин с
первоначально неизвестным состоянием тазовых органов. Степень
периовариальных спаек не является помехой для движения иглы под
ультразвуковым контролем, но должен быть специально обученный персонал и
яичники должны быть доступны для лапароскопии.
Далее рассмотрим еще несколько вариантов прямого фармакологического
воздействия на пролиферацего и коллагенобразующую функцию фибробластов с
помощью блокаторов медленных кальциевых каналов.
Обнаружена высокая концетрация Ca2+ в перитонеальных лимфоцитах и
макрофагах у пациентов с низкой перитонеальной ультрафильтрацией. [10]
Ионы Ca2+ необходимы для активирования иммунных клеток, продукции
лимфомонокинов и авторы проанализировали эффект нитроперитонеальной терапии
верапамилом у 16 пациентов с низкой ультрафильтрацией (UF). У 10 пациентов
с низкой UF терапия верапамилом увеличило объем UF, уменьшила пролиферацию
фибробластов и нормализовала предварительно высокий уровень концентрации
Ca2+ в перитонеальных лимфоцитах и накрофогах, уровни движения
лимфомонокипов.
Антипролиферативный эффект веропамила замечен и их опухолевые клетки
головного мозга in vitro. [11]
Научные исследования демонстрируют, что блокаторы Ca2+-ых каналов в
комбинации со стандартными противоопухолевыми препаратами помогают
преодолеть резистентность, которая часто развивается к этим препаратам. Но
мало известно о влиянии самих блокаторов Ca2+-каналов их опухолевые клетки.
Данные исследования показывают обратимый антипролиферативный эффект
веропамила их клетки медуллобластомы глиомы и нейроюластомы, установленный
в педиатрической практике.
Изучался и такой эффект веропамила, как влияние на катаболизм в
плазме липопротеинов низкой плотности фибробластов кожи человека.[12],
блокаторы ионов Ca2+ оказывают ингибирующий эффект на прокиферацию
фибробластов за счет подавления цитокинов, секретируемых альвеолярными
активированными макрофагами [13] и препараты данной группы, в частности,
нифедилин, способен оказывать подавляюшее действие на метаболизм
гингивальных фибробластов [14], в то же время стимулируя синтез LDL
рецепторов фибробластов кожи человека. [15]
В заключение хотелось бы сказать, что проблема послеоперационного
спаечного процесса, не смотря на колоссально большое число проведенных
исследований, остается актуальной как по разнообразию клинических
проявлений, осложнений, так и по поиску новых эффективных путей
профилактики и лечения.
Список литературы
1. Relationship of laparoscopic findings to self-report of pelvic
pain/ Anna L. Stoun, John F. Steege, Willliam C. Dodson// Am. J
Obstet Gynecol. – 1991 - №1-p.73-78
2. Correlation between sexual abuse and somatization in woman with
somatic snd non somatic chronic pelvic pain/ Robetr C. Reiter,
Lisa R. Shakerin, Joseph C. Gambone et al. // Am. J Obstet
Gynecol. – 1991 - №7-p. 104-108
3. Tumor necrosis factor – Land interlenkin-1? production by humsn
fetal Kupffer cells/ William H. Kutteh, William E. Rainey, Bruce
Beutler// Am. J Obstet Gynecol. – 1991 - №7- p.112-119
4. Evaluation of commonly used adjuvants in the prevention of
postoperative adhesions/ Authony A. Luciano, Katherine S.
Hauser, Jo Benda// Am. J Obstet Gynecol. – 1983 - №5- p.88-91
5. Adhesion prevention in the rabbit with sodium carboxymethylcellu
lose solutions/C. M. Frederickcks, I. Kotry, G, Holtz, H. H.
Askalani// Am. J Obstet Gynecol. – 1986 - №9- p.667-670
6. Prevention of pelvic adhesion formation by different modalities
of treatment/ Jamil A. Fayez, Peter J. Schheider// Am. J Obstet
Gynecol. – 1987 - №11- p.1184-1187
7. Adhesion formation and uterine tube healing in the rabbits
controlled study of the effects of ibuprofen and flurbiprofen/
John C. Jarrett II, M. Yusoff Dawood// Am. J Obstet Gynecol. –
1986 - №12- p.1186-1191.
8. Resolution of chronic pelvic pain after laparoscopic lysis of
adhesions/ John F. Steege, Anna L. Stoun// Am. J Obstet Gynecol.
– 1991 - №8- p.278-283
9. “Ultrasound rescue”: A success ful alternative from of oocyte
recorery in patients with periorarian adhesions/Patrick J.
Taylor, David Wiseman, Maha Mahadevan, Arthur Leader// Am. J
Obstet Gynecol. – 1986 - №2- p.240-244
10. Intraperitoneal verapomil therapy in CARD patients with
peritoneal hypopermeability. Effects on ultrafiltration/ Lamperi
S., Carozzi S., Nasini MG, Capera M., Zanin T.// Asaio Trans. –
1988. - № 7-9 - p.8
11. Antiproliferative effect of veropamil alone on brain tumor cells
in vitro/ Schmidt WF, Huber KR et all// Cancer Res. – 1988. - №7
– p. 13
12. Effect of calcium-chronnel-blocking drugs on lysosomal function
in human skin fibroblasbs/ Ranganathan S., Jackson RL// Biochem
Phormacol. – 1984. - №8. – p. 15
13. Effects of calcium blockers and calmodulin inhibitors on the
proliferabion of fibroblast in alveolar macrophage coudition
medium/ Zhu YL, Zhu YT, Guo ZJ// Chung Hua Chieh Ho Ho Hu His
Tsa Chih. – 1993. - №12 – p.6
14. Influence of nitedipine on the metabolism of gingival
fibroblasts8 Willershausen – Zonuchen B., Lemmen C., Zonuchen
B.// Biol Chem Hoppe Seyler. – 1994. – №5. – p. 5
15. Calcium channel blockers stimulate LDL receptor synthesis in
human skin fibroblasts/ Filipovic I.,Buddecke E.// Biochem
Biophys Res Commuun. – 1986. - №5 – p. 3
Страницы: 1, 2, 3
