следует проводить в двух пробирках, од на - контроль.
0ценка: В норме белка в моче не содержится.
Качественные пробы
Проба с сульфосалициловой кислотой
Реактивы:
- 20% раствор сульфосалициловой кислоты.
Ход исследования:
В пробирку наливают 4 - 5 мл мочи и добавляют 8 - 10 капель реактива. При
наличии белка в моче, в зависимости от количества его, может быть
помутнение или выпадает хлопьевидный осадок. Проба считается одной из самых
чувствительных, положительна при наличии белка в моче в количестве -
0,015%.
Проба с уксусной кислотой
- 10% раствор уксусной кислоты.
В пробирку наливают 8 - 10 мл мочи, нагревают верхний слой мочи до кипения
и прибавляют 8 - 10 капель уксусной кислоты. При наличии белка в нагретой
части мочи образуется помутнение или хлопья свернувшегося белка.
Количественное определение белка. (способ Робертса - Стольникова):
Принцип метода: Если при наслаивании мочи на азотную кислоту на границе
двух жидкостей образуется тонкое белое кольцо между 2-й и 3-й минутами, то
в исследуемой моче содержится 0,033%o белка.
- концентрированная азотная кислота,
В пробирку наливают 1 - 3 мл азотной кислоты и осторожно по стенке
наслаивают такое же количество мочи. Замечают время после наслаивания. Если
кольцо на границе жидкостей (рассматривать его следует на черном фоне)
образуется сразу или раньше 2-х минут после наслаивания, мочу необходимо
развести водой. После чего производят повторное определение белка в
разведенной моче. Разведение производят до тех пор,
пока белое кольцо при наслаивании на азотную кислоту разведенной мочи не
появится между 2-й и 3-й минутами. Количество белка вычисляют путем
умножения 0,033%o на степень разведения.
Определение сахара (глюкозы)
Качественная проба (проба Гайнеса)
Проба основана на свойстве глюкозы восстанавливать гидрат окиси меди в
гидрат закиси меди (желтый цвет) или закись меди (красный цвет).
реактив Гайнеса (смесь растворов сернокислой меди, едкого натра и
глицерина).
В пробирку наливают 3 - 4 мл раствора Гайнеса, прибавляют 8 - 10 капель
мочи и нагревают до кипения. При наличии сахара цвет мочи изменяется от
коричневато-зеленого до красного, в зависимости от количества сахара.
0ценка: В норме сахара в моче нет.
Количественное определение сахара мочи
Поляриметрический метод:
Принцип метода заключается в использовании свойства глюкозы вращать
плоскость поляризации вправо. По углу вращения поляризованного луча можно
определить количество глюкозы.
Ход определения:
Моча должна быть прозрачной, не содержать белка, кислой реакции. Для этого
мочу подкисляют слабой уксусной кислотой, кипятят, охлаждают и фильтруют.
Трубку
поляриметра заполняют профильтрованной мочой без пузырьков воздуха,
накрывают шлифованным стеклом, завинчивают плотно, насухо вытирают и
помещают в аппарат.
Определение производят спустя 2 - 3 минуты после заполнения трубки, так
как колебание частиц жидкости мешает исследованию. Оптически активный
раствор глюкозы, отклоняя луч, меняет интенсивность света в окуляре;
восстановить освещенность можно, повернув анализатор на определенный угол.
Угол отклонения выражается в градусах шкалы прибора. Угол отклонения в 1
градус соответствует 1 % глюкозы при длине трубки 18,94; если длина 9,47
- полученный результат умножить на 2.
Определение ацетоновых тел (проба Ланге)
К ацетоновым телам относятся ацетон, ацетоноуксусная кислота и
оксимасляная кислота. В моче встречаются совместно, поэтому раздельное их
определение клинического значения не имеет. В норме в моче не содержатся.
- смесь нитропрусидного натрия с сернокислым аммонием;
- раствор аммиака.
В пробирку насыпают немного, так чтобы было покрыто дно нитропрусидной
смеси, и приливают 5 мл мочи, взбалтывают и осторожно наслаивают 2 мл
аммиака. Фиолетово-красное кольцо, появившееся на границе двух жидкостей,
свидетельствует о наличии в моче ацетона.
Определение билирубина (проба Розина)
Качественная реакция основана на превращении билирубина под воздействием
окислителей (йода) в биливердин зеленого цвета.
- раствор Люголя или 1% спиртовой раствор йода.
На 3 - 4 мл мочи осторожно наслаивают 1 - 2 мл 1% спиртового раствора йода
или раствора Люголя. При наличии желчных пигментов (билирубина) на границе
жидкостей появляется зеленое кольцо.
0ценка: В норме билирубин в моче не содержится.
Определение уробилина (проба Флоренса)
- концентрированная серная кислота;
- эфир;
- концентрированная соляная кислота.
К 10 мл мочи добавляют 3 - 4 капли концентрированной серной кислоты,
смешивают, приливают 2 - 3 мл эфира, пробирку закрывают резиновой пробкой
и осторожно
смешивают, не взбалтывая. В другую пробирку наливают 2 мл
концентрированной соляной кислоты. Пипеткой отсасывают из первой пробирки
эфирный слой и наслаивают его на соляную кислоту. На границе жидкостей при
наличии уробилина образуется красно-фиолетовое кольцо различной
интенсивности.
Микроскопическое исследование
Приготовление препарата:
В центрифужную пробирку наливают 10 - 15 мл мочи и центрифугируют при 1000
- 1500 об/мин. 10 минут. После центрифугирования пробирку быстро
опрокидывают для удаления надосадочной жидкости, затем переводят в исходное
положение, чтобы осадок остался на дне. Пастеровской пипеткой осадок
размешивают, небольшую каплю осадка помещают на предметное стекло и
накрывают покровным. Микроскопия производится сначала под малым, а затем
под большим увеличением.
Элементы мочевого осадка
Различают организованный (эритроциты, лейкоциты, эпителиальные клетки,
цилиндры) и неорганизованный осадок (соли).
Организованный осадок:
Эритроциты могут быть неизмененные в виде дисков желтовато-зеленоватого
цвета, содержащих гемоглобин, и измененные (выщелоченные), свободные от
гемоглобина, бесцветные, имеющие вид одноконтурных или двухконтурных колец.
В норме содержатся
единичные эритроциты в препарате. Лейкоциты обнаруживаются в моче в виде
небольших зернистых клеток правильной округлой формы серого цвета.
Лейкоциты в моче представлены нейтрофилами и содержатся в небольшом
количестве в нормальной моче до 2000000 в сутки). Видоизмененные
лейкоциты, так называемые клетки Штернгеймера- Мальбина. Для выявления их
после центрифугирования к осадку прибавляют 1 - 2 капли краски,
предложенной Штернгеймером и Мальбиным, размешивают, каплю берут на
предметное стекло, покрывают покровным и микроскопируют. Клетки
Штернгеймера-Мальбина в 2-3 раза больше обычных лейкоцитов, бледно-синие с
бледно-синим или бледно-фиолетовым ядром, в цитоплазме заметно движение
гранул.
Клетки эпителия:
Плоский эпителий - большие (в 3 - 4 раза больше лейкоцитов), широкие
полигональные клетки с одним ядром и мелкозернистой цитоплазмой.
Встречаются группами и пластами. Наличие этих клеток в моче не имеет
особого диагностического значения.
Клетки круглого эпителия - довольно крупные, правильной округлой или
овальной формы с гомогенной или мелкозернистой протоплазмой и небольшим
ядром. В нормальной моче - единичные.
Почечный эпителий - небольшие круглые или кубические клетки с большим
пузыриковидным ядром и слегка зернистой протоплазмой. В нормальной моче не
обнаруживаются.
Цилиндры - белковые или клеточные образования канальцевого происхождения,
имеют цилиндрическую форму. В нормальной моче может быть небольшое
количество только гиалиновых цилиндров (2000 за сутки).
Гиалиновые цилиндры - слепки белка, нежные, бледные, почти прозрачные
образования, прямые и извитые, концы их закруглены или неправильно
обломаны.
Зернистые цилиндры - короткие широкие - состоят из зерен различной
величины, имеют темный, часто желто-коричневый цвет.
Восковидные цилиндры - очень толстые, короткие с желтоватым цветом воска,
хорошо контурированы.
Эпителиальные цилиндры имеют четкие контуры, состоят из клеток почечного
эпителия.
Эритроцитарные цилиндры - желтого цвета, состоят из массы эритроцитов.
Цилиндроиды похожи на гиалиновые цилиндры, но не имеют продольной
исчерченности, контуры их неправильные, концы раздваиваются.
Кроме того, в осадке могут быть: сперматозоиды, бактерии, дрожжевые и
другие грибки.
Неорганизованный осадок:
В кислой моче встречаются:
Мочевая кислота - кристаллы разнообразной формы (ромбической,
шестигранной, в виде бочонков, брусков и др.), окрашенные в красно-бурый
или желтовато-бурый цвет. Микроскопические кристаллы в осадке мочи имеют
вид золотистого песка.
Ураты - аморфные мочекислые соли - мелкие желтоватые, часто склеенные
группами зернышки. Микроскопически ураты имеют вид плотного кирпично-
розового осадка.
Оксалаты - бесцветные кристаллы в форме почтовых конвертов - октаэдров.
Сернокислая известь - тонкие, бесцветные иглы или розетки. В щелочной и
нейтрального моче встречаются:
Фосфаты - аморфные массы солей сероватого цвета (мелкозернистые).
Микроскопически - осадок белого цвета.
Трипельфосфаты - бесцветные яркие кристаллы в виде гробовых крышек или
длинных призм.
Мочекислый аммоний - желтые непрозрачные шары с шипами на поверхности.
Функциональные пробы почек и количественный метод определения форменных
элементов
Проба по Зимницкому
В каждой из 8-ми полученных порций замеряют количество мочи с помощью
мерного цилиндра в определяют удельный вес по ранее разобранной методике. В
норме количество мочи за сути - 1000 - 1500 мл, количество мочи в каждой
порции 70 - 250 мл; дневной диурез - 2 части, ночной - 1 часть; колебания
удельного веса - 1012 - 1025.
Проба по Каковскому - Аддису
Принцип исследования заключается в определении числа форменных элементов
(эритроцитов, лейкоцитов, цилиндров) в суточном количестве мочи с помощью
счетной камеры.
Посуда и оборудование:
Счетная камера.
Градуированная центрифужная пробирка.
Мерная посула.
Микроскоп.
Ход исследовании:
Количество мочи, соответствующее объему, выделенному за 1/5 часа (за 12
минут), наливают в центрифужную пробирку и центрифугируют при 2000 об/мин.
в течение 5 минут. Пипеткой отсасывают надосадочную жидкость, оставляя 0,5
мл осадка. Осадок смешивают и пипеткой заполняют счетную камеру Горяева.
Считают отдельно лейкоциты, эритроциты, цилиндры. Исследуемый осадок можно
смешать с 1-2 каплями краски
Штернгеймера в Мальбина для выявления наличия в моче клеток Штернгеймера -
Мальбина. Подсчет клеток производится под большим увеличением в 100 любых
больших квадратах. Полученное количество клеток 1 ммЗ умножают на 60 000,
узнают количество
форменных элементов, выделенных с мочой за сутки. Для нормаль ной мочи
количество эритроцитов до 1 млн.; лейкоцитов до 2 млн., цилиндров до 2000.
Бактериоскопическое исследование
Бактериоскопическое исследование производят, главным о6 разом, с целью
обнаружения микобактерий туберкулеза.
Утреннюю порцию мочи, собранную в стерильную посуду, отстаивают.
Образовавшийся осадок собирают пипеткой в центрифужную пробирку и
центрифугируют. Из осадка
приготавливают мазки, хорошо высушивают, фиксируют над пламенем и
окрашивают по Цилю Нильсену (см. раздел ) и затем
микроскопируют.
Микобактерии туберкулеза, имеющие вид палочек, окрашены в красный цвет и
отчетливо выделяются на синем фоне препарата.
Страницы: 1, 2, 3, 4
