Рефераты. Экспресс диагностика особо опасных инфекций

регистрировали их ферментацию. В результате применения оптимальных

полисубстратных сред производится выделение и накопление чистой культуры

микробов с одновременным определением их биохимических признаков.

Перспективным следует рассматривать развитие энзимоиндикационных

методов, в которых субстрат с индикатором отделен от питательной среды и

фиксирован на специальном носителе. В нашей стране разработаны углеводно-

бумажные диски с защитной пленкой (бумажные реагенты для определения

дезаминаз у микробов) и их аналоги БИС (бумажно-индикаторные системы),

углеводно-бумажные поплавки, углеводно-полимерные пленки . Все эти

препараты являются весьма перспективными, они позволяют в течение

кратчайшего срока (3—5 ч), используя общепринятые питательные среды и

лабораторную посуду, определять ферментативную активность различных видов

микроорганизмов.

Автономный препарат — карандаш-фермент, не имеющий аналогов ни у нас,

ни за рубежом, позволяет без применения питательных сред непосредственно на

предметном стекле определять биохимические свойства микробов.

Полисубстратная тест-система и энзимоиндикаторная лента используются

для одновременной идентификации 20 биохимических признаков у микробов. Это

новые виды простых «долгоживущих» препаратов, предназначенных для быстрого

и экономичного определения биохимических свойств микробов.

Электрофизический метод определения ферментативной активности микробов

включает посев микробной культуры на жидкие питательные среды, содержащие

пептонную воду, различные углеводы, многоатомные спирты, аминокислоты с

последующим ферментативным расщеплением исследуемых веществ и образованием

различных ионизированных продуктов распада, обнаруживаемых специальной

электронной аппаратурой. Результаты энзимоиндикации регистрируются через

45—60 мин с момента посева материала. Метод позволяет обнаружить и

идентифицировать конечные продукты распада, то есть конечные мотаболиты с

определением их биохимической и химической природы. Безусловно,

электрофизический метод заслуживает пристального внимания и нуждается в

дальнейшем изучении и доработке.

2. Иммунологическое направление, связанное с быстрым определением как

отдельных специфических детерминант, так и с индикацией целых антигенных

групп и комплексов, характеризующих роды, виды и серовары бактерий. К

собственно иммунологическому направлению мы относим классические

иммунологические методы, основанные на использовании естественных

реагентов. Реакции преципитации в жидкости по Асколи и в геле по Оухтерлоню

и Манчини (особенно их микроварианты) сохраняют свое значение как методы

экспресс-индикации патогенных микробов и выявления их антигенов в различных

материалах.

Перспективными являются рапид-системы для одновременной и быстрой

индикации различных видов микроорганизмов в реакциях микроагглютинации,

хотя по-прежнему не решены вопросы создания оптимальных видов и наиболее

экономичных форм таких систем. Иммунологические принципы распознавания

антигенов являются весьма тонкими, специфическими, чувствительными, с

большими индикационно-диагностическими возможностями. Комплексирование

иммунологических принципов с физическими, химическими и некоторыми другими

принципами способствовало дифференциации иммунологического направления на

ряд самостоятельных направлений, которые приводятся ниже.

3. Иммунофизическое направление, использующее различные по природе,

форме и величине виды мелкодисперсных носителей (сорбентов) антигенов и

антител, способствующих повышению чувствительности комплексных

иммунологических методов.

Реакции пассивной гемагглютинации и их модификации связаны с

использованием эритроцитарных диагностических препаратов. Эритроцитарную

диагностику с успехом применяются для ускоренного обнаружения и

идентификации как патогенных, так и условно-патогенных микроорганизмов

(например, возбудителей туляремии, бруцеллеза, сальмонеллеза и др.) в

различных патологических материалах, получаемых от больных, и в объектах

внешней среды. Реакции с эритроцитарными диагностикумами являются весьма

чувствительными, и в этом отношении часто превосходят другие серологические

реакции. Они введены в официальные инструкции по экспресс-индикации

бактериальных агентов в элементах внешней среды и в материалах, полученных

от пораженных людей и животных.

Одновременно продолжаются поиски новых носителей антигенов и антител,

которые были бы безантигенными, стабильными, не разрушающимися при

длительном хранении, а применяемые реакции — простыми по технике постановки

(например, стекольные тесты) и исследования с их помощью — экономичными.

Совершенствуются реакции с применением цветных целлюлозных частиц в

качестве носителей антигенов и антител. Положительными свойствами такого

рода препаратов являются: 1) отсутствие собственной антигенности; 2)

стабильность при длительном хранении; 3) демонстративность и простота

техники постановки реакции, обычно на предметном стекле; 4) высокая

скорость прохождения реакции; 5) экономичность.

Кроме того, полезным и оправданным считаем поиск новых носителей

антигенов и антител. В этом отношении перспективными являются ионообменные

смолы, латексы, целлюлоза и ее производные и ряд других веществ, которые

могут способствовать повышению чувствительности серологических реакций.

4. Иммунохимическое направление, связанное с использованием

разнообразных комплексных соединений специфических антител или антигенов с

химическими веществами. Присоединенные химические вещества придают им новые

феноменологические способности и свойства, тем самым, расширяя возможности

экспресс-индикации микробных агентов в частности и лабораторного анализа

вообще.

Большую популярность и практическую значимость приобрели методы

быстрого иммунофлуоресцентного анализа (прямой, непрямой,

антикомплементарный), которые ныне официально используются как методы

экспрессной индикации и быстрого определения микроорганизмов.

Дальнейшее развитие весьма перспективного иммунохимического направления

во многом зависит от химиков, которые должны разработать достаточно яркие

новые красители, вступающие в соединения со специфическими антителами и

антигенами. В результате могут быть получены препараты с новыми

феноменологическими свойствами, позволяющими проводить экспресс-индикацию

микробных культур и отдельных клеток с помощью широко распространенных

микроскопических устройств (типа МБИ различных марок).

5. Иммуноферментное направление, интенсивно развивающееся в последние

годы. Разработаны прямой, непрямой, антикомплементарный и другие методы

быстрого обнаружения микробов путем использования иммуноэнзимологического

принципа; предложены новые виды ферментов, а также разнообразные виды

хромогенных субстратов. Данное направление является весьма перспективным,

развитие его может привести в ближайшие годы к появлению новых методов

экспресс-индикации микроорганизмов.

6. Иммуноэлектрофоретическое направление успешно развивается с конца 50-

х годов. Разработаны многочисленные методы иммуноэлектрофореза. Однако для

целей экспресс-индикации микробов чаще прибегают к встречному

иммуноэлектрофорезу. Применение новых химических красителей, ферментной или

радиоактивной метки позволит резко повысить чувствительность метода

иммуноэлектропреципитации.

7. Иммунорадиологическое направление связано с использованием

разнообразных конъюгатов специфических антител или антигенов, соединенных с

радиоактивными веществами, которые придают им новые феноменологические

свойства и способности, расширяя возможности экспресс-индикационного

метода. Весьма перспективно дальнейшее развитие иммунорадиологического

направления, так как оно несомненно приведет к созданию новых, простых

методов экспресс-индикации микроорганизмов.

8. Микроцитологическое направление быстрого цитоморфо-логического

анализа связано с использованием светлопольной, фазово-контрастной или

люминесцентной микроскопии бактериологических мазковых препаратов,

обработанных и окрашенных красителями, позволяющими быстро идентифицировать

микроорганизмы по их морфологии и специфическим структурным элементам

микробной клетки. Исследованию подвергают как нативный (гной, мокрота,

моча, СМЖ, различные экссудаты и др.), так и обогащенный (например,

центрифугированием, фильтрованием и другими методами) патологический

материал.

9. Бактериологическое направление связано с ускоренным выделением и

накоплением бактериальных популяций патогенных, условно-патогенных и

санитарно-показательных микроорганизмов. Оно основано на использовании

оптимальных ростовых питательных сред, содержащих необходимые

биостимуляторы, для ускоренного получения бактериальной культуры и

частичной их идентификации по совокупности культуральных признаков.

10. Фагодиагностическое направление, которое предусматривает, с одной

стороны, идентификацию микробов с помощью специфических индикаторных

бактериофагов, а с другой,— обнаружение и индикацию специфических фагов в

патологическом и другом материалах с помощью индикаторных микробных

культур.

Ускоренная фагодиагностика в ряде случаев является необходимым и

полезным методом, позволяющим значительно сократить сроки исследований и

установить природу возбудителя даже в тех случаях, когда другими методами,

в виду его изменчивости или загрязненности материала, он остается

Страницы: 1, 2, 3, 4, 5



2012 © Все права защищены
При использовании материалов активная ссылка на источник обязательна.